Kits de culture cellulaire M3D Greiner Bio-One

Culture Cellulaire M3D Magnétique

La culture cellulaire M3D magnétique de Greiner Bio-One se fonde sur la technologie de magnétisation des cellules avec les billes NanoShuttleTM-PL. Grâce aux forces magnétiques, les cellules s’agrègent soit par lévitation, soit par bio-impression, pour former des modèles de représentation structurelle et biologique M3D in vitro. Les billes NanoShuttleTM-PL se composent d’or, d’oxyde de fer et de poly-L-lysine. Ces nanoparticules (Ø < 50 nm) aimantent les cellules en se fixant de manière électrostatique aux membranes cellulaires pendant une incubation statique nocturne. Après cette incubation, les cellules magnétisées apparaissent truffées de nanoparticules sombres. NanoShuttleTM-PL est biocompatible, n’a aucun effet sur le métabolisme, la prolifération et le stress inflammatoire. En outre, les billes n’interfèrent pas avec les techniques expérimentales, telles que la fluorescence ou le Western blot. L’utilisation de sphéroïdes magnétisés facilite l’ajout et le retrait de solution, grâce à la force magnétique qui les maintient dans une position stationnaire pendant l’aspiration et limite leur perte. Les sphéroïdes peuvent également être prélevés et transférés d’une cuve à l’autre en utilisant des outils magnétiques tels que le MagPenTM (7.657 850).

Les avantages de la culture cellulaire magnétique :

• M3D dans un flux de travail 2D
• Assemblage rapide des cellules en 3D
• Manipulation facile / pas de perte d'échantillon
• Évolutif : de 1 à 384 puits
• Permettant la co-culture des cellules
• Criblage à haut débit (HTS) avec fond plat pour l’imagerie optique
• Prêt pour l’automatisation
• Positionnement centré des sphéroïdes dans le puits

Lévitation magnétique
La lévitation magnétique est un outil simple de création d’environnements tissulaires natifs in vitro. Les cellules sont magnétisées avec NanoShuttle™-PL pendant une incubation nocturne et sont placées dans une boîte qui limite l’adhérence cellulaire (technologie Cell-Repellent) ou une plaque multipuits. Un aimant, placé au-dessus de la cuve, les attire alors vers le haut. Lors de la lévitation, les cellules se détachent du fond rigide du puits et les forces magnétiques jouent le rôle d’un échafaudage invisible : elles regroupent rapidement les cellules, favorisent les interactions inter-cellulaires et induisent la synthèse de la matrice extracellulaire. La méthode de lévitation magnétique a été utilisée avec succès pour effectuer des cultures M3D avec différents types de cellules, incluant les cellules souches et les cellules primitives. L’application principale de cette technologie est la culture cellulaire tridimensionnelle dans différentes conditions ambiantes, permettant l’analyse de ces cultures avec les techniques de recherche biologique courantes, telles que l’analyse immunohistochimique et le Western blot.


Bio-impression magnétique
Contrairement à la lévitation magnétique, la bio-impression 3D magnétique forme des sphéroïdes à partir de cellules magnétisées avec les NanoShuttleTM-PL dans une microplaque, qui sera ensuite positionné sur un support aimanté. Les aimants situés en dessous de chaque puits utilisent des forces magnétiques légères pour induire l’agglomération des cellules et imprimer un sphéroïde au fond de chaque puits. Au bout de 15 minutes jusqu’à quelques heures, la plaque contenant les sphéroïdes peut être retirée du mécanisme magnétique et mise en culture à long terme sans utiliser de force magnétique. Ce système élimine les limitations d’autres plateformes car il permet la formation rapide de sphéroïdes détachés de tout substrat rigide, reproductibles en taille, sans restriction sur les types de cellules, et évolutifs pour les formats à haut débit (96 et 384 puits). Avec la bio-impression 3D magnétique, les sphéroïdes viables imprimés peuvent devenir compacts et se développer au fil du temps, facilitant l'évaluation continue de la viabilité cellulaire et d’autres fonctions en utilisant les tests disponibles dans le commerce. La méthode d’impression 3D combinée aux méthodes de test standardisées disponibles dans le commerce constituent un outil idéal pour le criblage à haut débit de composés.


Impression magnétique d’anneaux et système d’imagerie
En outre, il a été démontré que la bio-impression 3D magnétique d'anneau celluaire, peux etre utilisée pour développer de nouveaux tests de criblage à haut débit par imagerie cinétique automatisée. Ces tests sont le fondement d’un criblage solide des effets de composés sur la migration cellulaire. Sur la base de la bio-impression 3D magnétique, les cellules magnétisées NanoShuttleTM-PL sont imprimées en anneaux 3D. Immédiatement après l’impression, ces structures deviendront compactes avant finalement de se fermer, en fonction de la migration et de la viabilité des cellules. La fermeture de l’anneau peut être capturée en utilisant un kit d'imagerie compact avec un iPod*) programmé par une application gratuite (Experiment Assistant) qui permet de photographier les plaques entières à des intervalles spécifiques, évitant ainsi d’avoir à examiner les puits un à un au microscope. La contraction de la culture se termine généralement au bout de 24 heures, et les images sont traitées par lots pour générer rapidement les données de toxicité. En outre, comme la fermeture est non marquée, les anneaux restants sont disponibles pour une expérimentation ultérieure (IHC, Western blot, génomique, etc.).